مشکلات احتمالی و تکنیک های عیب یابی دستگاه HPLC

این یک واقعیت انکار ناپذیر است که دستگاه های کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC) دستگاه هایی با تکنولوژی بسیار پیشرفته ای هستند.سکوبندی ازمایشگاهی  اما همین دستگاه های پیشرفته نیز گاهی اوقات دچار خطا ها و عیب هایی می شوند که ممکن است اپراتور دستگاه و پژوهشگران را با مشکلاتی مواجه کنند. در صورتی که پرسنل با عیب های احتمالی و نحوه برطرف کردن آن ها آشنایی لازم را داشته باشند، این مشکلات مانعی برای ادامه کار به وجود نخواهند آورد. این مقاله به شما کمک خواهد کرد به سرعت عیب یابی دستگاه HPLC خود را انجام دهید.

مشکلات احتمالی رایج در آنالیز های HPLC

مشکلاتی مانند فشار ستون، تغییرات شکل و محل پیک ها، تغییر رتنشن تایم یا زمان پایداری، نوسانات بیس لاین و نشتی ها در دستگاه های HPLC بسیار رایج هستند. به وجود آمدن این مشکلات باعث می شوند شما داده های استباه به دست بیاورید. در نهایت رفع نشدن این خطا ها منجر به هدر رفتن نمونه های گران قیمت، نمونه هایی که بسیار سخت به دست آمده اند، مواد مصرفی و مواد شیمیایی می شوند. همه این عوامل به طور مستقیم به هزینه های عملیاتی یک آزمایشگاه تاثیر می گذارند.

 در نتیجه آگاه بودن به علل مشکلاتی که ممکن است در حین آزمایش ها به  وجود بیاید و تکنیک های عیب یابی دستگاه HPLC برای افرادی که روزمره با این دستگاه کار می کنند، بسیار ضروری است.

در ادامه به دلایل بروز خطا های رایج و نحوه عیب یابی دستگاه HPLC خواهیم پرداخت.

فشار برگشتی ستون (Column backpressure)

فشار برگشتی ستون های کروماتوگرافی به دلیل تجمع ذرات یا میکروارگانیسم ها در ورودی یا داخل ستون، افزایش پیدا می کند.

 برای حفظ فشار برگشتی ستون موارد زیر را رعایت کنید

  • از محلول فاز متحرک تازه آماده شده و فیلتر شده استفاده کنید.
  • برای جلوگیری از انسداد سوزن یا ستون، نمونه ها را پیش از استفاده فیلتر یا سانتریفیوژ کنید.(خصوصا نمونه های بیولوزیکی و مواد غذایی)
  • بافر با غلظت مناسب تهیه کنید تا ترسیب اتفاق نیفتد.
  • ستون ها را شست و شو دهید تا رسوب ذرات در ان ها باقی نمانند.
  • فیلتر های ستون ها در زمان های مشخص تعویض یا تمیز کنید.  
  • اتصالات در مسیر جریان به خصوص قبل از ستون را بررسی کنید تا نشتی نداشته باشند.
  • حجم کافی فاز متحرک را در هر ران وارد کنید.
  • برای جلوگیری از ایجاد حباب هوا ددر مسیر، از حلال های گاززدایی شده استفاده کنید.
  • فیلتر های ورودی ظرف حلال را تمیز نگه دارید.

https://hakimazma.com/%d8%af%d8%b3%d8%aa%da%af%d8%a7%d9%87/%da%a9%d9%88%d8%b1%d9%87/

  • در صورت نوسانات فشار به دلیل تشکیل حباب های هوا در پمپ، پمپ را تمیز کنید و در صورت نیاز، چک ولو ها را تعویض کنید. برای جلوگیری از ورود هوا به پمپ از حلال های گاز زدایی شده  استفاده کنید.
  • در صورت امکان دمای ستون را چک کنید. بالا رفتن دمای ستون، امکان کاهش فشار را بیشتر می کند.